全蝎醇提物干预氯化锂-匹罗卡品致癫痫持续状态大鼠海马神经细胞凋亡及Caspase-3的表达
喻良，孙红斌，梁益，谢彦，何保明，许飞(四川省医学科学院·四川省人民医院神经内科，四川省成都市610072)
喻良，男, 1970年～，医学硕士，副主任医师，主要从事癫痫的基础与临床研究。yuliang70a@yahoo.com.c
通讯作者：孙红斌，1960年～，医学硕士，主任医师，主要从事癫痫的基础与临床研究。Shb1369@yahoo.com.cn
国家自然科学基金资助项目（30740035）；四川省攻关课题立项资助项目（05SG1672）
摘要
背景：既往的研究表明全蝎中的蝎毒具有确切的抗癫痫及抗细胞凋亡作用，但包含除蝎毒外全蝎主要有效成分的全蝎醇提物是否具有同样的作用，至今不详。
目的：实验采用氯化锂-匹罗卡品致大鼠癫痫持续状态模型，首次观察全蝎醇提物对海马神经细胞凋亡及Caspase-3表达的影响，同时将全蝎醇提物作用与阳性对照药丙戊酸钠相比较。
设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-05/2008-04在康弘药业有限公司药品研发中心及四川省医学科学院? 四川省人民医院病理科完成。
材料：山东产东亚钳蝎的全蝎醇提物由华神制药有限公司制备；丙戊酸钠购自湖南湘中制药有限公司；氯化锂和匹罗卡品购自Sigma公司。
方法：取156只中的6只为正常对照组，其余150只大鼠腹腔注射LiCl及Pilo制备癫痫持续状态模型，然后随机分为5组，每组30只：丙戊酸钠组和全蝎醇提物低、中和高剂量干预组，分别于癫痫发作后15min灌胃戊酸钠 120mg/（kg.d）或全蝎醇提物290，580，1160 mg/（kg.d）；正常对照组与模型组给予生理盐水1mL/0.1kg。
主要观察指标：采用TUNEL技术和免疫组化技术检测癫痫持续状态后6，24，48，72h和7d海马TUNEL阳性细胞及Caspase-3表达的动态变化，并观察大鼠行为学变化。
结果：正常大鼠海马未见TUNEL阳性细胞，但可见极少量的Caspase-3阳性细胞。癫痫持续状态后6h各组致痫大鼠海马均可见部分TUNEL和Caspase-3阳性细胞，主要分布在CA1区和CA3区，其中模型组TUNEL阳性细胞72h达高峰，而丙戊酸钠、全蝎醇提物中、高剂量干预组高峰提前到癫痫持续发作后48h，各组Caspase-3阳性表达细胞均于癫痫持续发作后48h达高峰。经丙戊酸钠和EES干预后各观察时点TUNEL和Caspase-3阳性细胞数几乎均较模型组显著减少（P＜0.05）；且TUNEL和Caspase-3阳性细胞数：全蝎醇提物高剂量组<全蝎醇提物中剂量组<全蝎醇提物低剂量组, 丙戊酸钠组与全蝎醇提物高剂量相近。经全蝎醇提物中、高剂量和丙戊酸钠治疗后，大鼠发作级别及癫痫发作持续时间较模型组显著改善（P＜0.05或P＜0.01）；其中以全蝎醇提物高剂量和丙戊酸钠疗效最好，且二者疗效相当（P＞0.05）。
结论：1160 mg/（kg.d）的全蝎醇提物提物能显著对抗癫痫持续状态发作，疗效与凋亡细胞和Caspase-3细胞的减少相对应，且作用效果与丙戊酸钠相当。说明在使用全蝎抗癫痫时无需提取其中的某种成分，适当剂量的全蝎醇提物具有明显的抗癫痫作用，且其作用途径可认为与并可能通过抑制海马神经细胞Caspase-3的表达相关。
关键词：全蝎醇提物；细胞凋亡；TUNEL；caspase-3；氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态模型

中文全文见附件。

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