静脉移植人脐血间充质干细胞对脊髓缺血再灌注损伤大鼠的保护作用
邹俊，干旻峰，朱雪松，耿德春，杨惠林
苏州大学附属第一医院骨科，江苏省苏州市，215006
邹俊，男，1979年生，硕士，主治医师，主要从事脊柱外科的基础与临床研究。 E-mail：jzou@suda.edu.cn
通讯作者：杨惠林，博士，教授，博士生导师，主要从事脊柱外科的基础与临床研究。E-mail：hlyang@suda.edu.cn
摘要
背景：研究发现人脐血间充质干细胞移植对脊髓缺血再灌注损伤有较好的治疗效果，但其神经保护作用的机制尚不清楚。
目的：建立脊髓缺血再灌注损伤大鼠模型，观察经静脉移植人脐血间充质干细胞的存活情况及其对大鼠后肢运动功能的影响，同时检测脊髓组织IL-8的表达及细胞凋亡情况，探讨人脐血间充质干细胞移植对脊髓缺血再灌注损伤的保护机制。
设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-01/2008-12在苏州大学附属第一医院骨科实验室完成。
材料：人脐血间充质干细胞取自苏州大学附属第一医院产科健康产妇分娩后自愿提供的脐带脐血。兔抗人BrdU单克隆抗体购自美国DAKO公司，TUNEL和ELISA试剂盒均购自武汉Boster公司。  
方法：将健康成年Wistar大鼠72只随机分为3组：假手术组、模型组、移植组，每组24只。模型组和移植组采用腹主动脉阻断法建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型。假手术组不阻断肾下腹主动脉。移植组于夹闭腹主动脉前自大鼠后肢大隐静脉注入0.2~0.3 mL Brdu标记的人脐血间充质干细胞悬液(细胞浓度为5×10³/μL)，模型组、假手术组给予等量生理盐水。
主要观察指标：术后6，24，48h HE染色观察大鼠脊髓组织病理学改变；免疫组织化学方法观察大鼠脊髓组织人脐血间充质干细胞的存活情况；TUNEL法检测脊髓组织细胞凋亡情况；ELISA法测定脊髓组织中IL-8含量；Jacobs评分法测定大鼠后肢运动功能。
结果：移植组脊髓组织中可见大量棕褐色的Brdu阳性细胞。与模型组比较，移植组脊髓组织凋亡细胞数目和IL-8含量均明显较少（P<0.05），组织病理损伤有显著改善，运动功能评分显著提高（P<0.05）。
结论：经静脉移植的人脐血间充质干细胞可到达损伤区并可大量存活，可显著改善损伤脊髓组织的病理学改变及缺血再灌注损伤大鼠的运动功能，其保护作用可能是通过抑制神经细胞凋亡和减少炎症介质的产生来实现的。
关键词：脐血间充质干细胞；脊髓缺血再灌注损伤；保护作用；凋亡；炎症介质

中文全文见附件。

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