胶原蛋白-硫酸肝素生物支架植入猪脑内有良好的生物相容性：以神经元凋亡为评价标准
唐洲平^【1】  陈兴泳^【2】  曾文高^【1】 徐沙贝^【1】 谢雪微^【1】  唐荣华^【1】  朱遂强^【1】
（1华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科 湖北省武汉市 430030，2福建省立医院神经内科 福建省福州市 350001）
唐洲平：男 ，1969年12月生， 博士， 副教授， 硕士生导师，主要从事干细胞-生物支架移植治疗脑卒中的工作。Email:ddjtzp@163.com。
通讯作者：朱遂强，男，1964年3月生，博士，教授，博士生导师，主要从事脑血管病脑内腺苷系统的抗癫痫和脑保护作用机制研究。Email:zhusuiqiang@163.com。
国家自然科学基金资助项目(30570628，30770751)
摘要
背景：以胶原及硫酸肝素为材料的生物支架广泛用于神经损伤的研究，并已证明有促进神经再生作用。以往研究多从胶质细胞增生的角度评价支架的生物相容性，但从其对神经元凋亡影响的角度进行研究及其相关报道均较少。
目的：通过检测支架周围神经元凋亡程度和凋亡相关蛋白的表达水平，探讨胶原蛋白-硫酸肝素生物材料支架在猪脑内的生物相容性。
设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008-03/06在华中科技大同济医学院附属同济医院神经科实验室完成。
材料：兔抗人Bax、Caspase-3多克隆抗体(浓缩型)；鼠抗人Bcl-2多克隆抗体(浓缩型)；霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化试剂盒；TUNEL试剂盒(美Roche公司)。
方法：健康成年的农家小猪20只，随机分别给予如下干预：取小猪前囟区域为穿刺点，将胶原蛋白-硫酸肝素生物支架以注射方式植入猪脑组织内（n=10）。对照组只造成相同的穿刺损伤，但无支架植入（n=10）。
主要观察指标：TUNEL法检测支架周围神经元凋亡水平，SABC免疫组化方法检测细胞凋亡相关的蛋白Bax，Bcl-2、Caspase-3的蛋白表达水平。
结果：支架植入后第1，3，7，14d深部穿刺点周围脑组织内出现少量凋亡细胞，细胞凋亡数高于未植入支架组（P<0.05），但是在植入后第30天时细胞凋亡水平与未植入支架组差异无统计学意义。支架植入组Caspase-3，Bax、Bcl-2蛋白表达水平在第3，7d时高于对照组(P<0.05)，Bcl-2/Bax比值在第3，7d时低于对照组(P<0.05)。而在30d时两组间上述蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）。
结论：胶原蛋白-硫酸肝素支架与猪脑组织具有良好的生物相容性。
关键词：生物材料；支架；胶原蛋白；硫酸肝素；神经元凋亡；生物相容性

中文全文见附件。

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